磷灰石水泥骨块(CPC)及其浸出液的制备羟基磷灰石人工骨,

自制磷酸钙骨水泥人工骨的生物安全性（西安交通大学：1.第二医院骨科，第一医院骨科，陕西西安 710004 710061) 摘要：目的评价自制磷酸钙骨水泥人工骨（CPC）的生物相容性。观察L2929细胞相对增殖情况，评价CPC；人工骨对细胞的潜在毒性作用；将CPC人工骨制成一定大小和形状植入新西兰兔股骨肌内，观察组织反应程度植入后不同时间观察样品周围，评价CPC对组织的刺激性和相容性，结果表明CPC对L2929靶细胞无毒性作用；植入后，对周围组织和肌肉没有刺激性反应。结论 CPC人工骨具有良好的生物相容性。关键词：CPC人工骨； L2929 细胞；肌肉嵌入；生物相容性CLC：R31 8. 17文献标识码：A编号：167128759（200 4) 0120051203BiocompatibilitystudybonesubstitutecalciumphosphatecementTongZhichaoWangKunzhengLiuMiaoLiShumingBaiBinLiYi（DepartmentOrthopedicsSurgerySecondHospitalXiπanJiaotongUniversityXiπan710004China）摘要：收到ObjectivehebiocompatibilithosphatextractheCPCartificialbonecultureL2929cellsmorphologygrowtwereobserved.WeanalyzedCPCπsotentialcellsransplantedCPCNewsLandrabbitsπmusclesanalyzeditsexcitatibiocompatibilitambienttissue.ResultCPCcontainedL2929cellsritatiambienttissues.ConclusionCPChasexcellentbiocompatibilitKEYWORDSCPCbonesubstitutL2929cellmplantedbiocompatibilit日期：2003205208修订日期：2003208224基金项目：由资助陕西省科技基金（No：2000142 G16 作者简介：盖超（19712)，男（汉族），博士生。羟基磷灰石人工骨是1976年开发的一种新型骨修复材料。实验和临床应用离子已证明该材料具有良好的生物相容性和广泛的临床应用价值，并且在使用过程中不断开发新型羟基磷灰石人造骨，以改善羟基磷灰石的缺点。

据此，本研究改变了羟基磷灰石人工骨的传统陶瓷结构，使其成为一种新型的水泥基羟基磷灰石人工骨结构。是一个重要的部分。我们通过细胞毒性实验和短期肌内植入实验对其生物相容性进行了评价，为骨组织工程中生物材料的选择提供了一些基础信息。羟基磷灰石水泥砌块（CPC）及其渗滤液的制备 羟基磷灰石水泥砌块（CPC）的制备：由两种或两种以上的磷酸钙盐粉末和固化液组成，术前预制成mm10mm的柱状骨。块，用环氧乙烷灭菌。材料提取液的制备：将CPC骨块切成薄片，用1mm厚的蒸馏水洗涤，滤纸干燥，医用不锈钢丝悬吊，高压蒸汽灭菌。将细胞培养液以样品表面积10mL的比例加入到装有CPC的无菌培养瓶中，制备40mL供试液，封闭瓶口，浸出37分钟。细胞）第48-72代取生长旺盛的L2929细胞，胰蛋白酶消化5-10min，在完全培养基中Hankπs，调整细胞浓度至410。将细胞悬液分别注入试管（1mL备用管，10管为材料组），将10个阳性对照组置于37恒温培养箱中培养24。取33培养瓶，加入4 mL细胞培养基，将37培养为24，使细胞贴壁。培养24天后，每管弃去原培养基，阴性对照组13管换成新鲜完全培养基，阳性对照组10管换成含6.%(体积分数）苯酚，将实验组10管换成含有6.%（体积分数）苯酚的细胞培养基。用新鲜培养基交换50%（体积分数）的原料提取物。

剩下的37人会继续修炼。细胞形态观察和计数：换液当天取阴性对照组3管，更换后第一管进行细胞形态观察和细胞计数。倒置显微镜观察细胞形态，拍照对比。确定细胞的相对增殖程度 (RGR)。细胞毒性按照细胞形态分析标准（ournaliaotong Universit Medical Sciences）VolFeb.2004反应分级标准进行评价。细胞计数法：用消化酶溶液消化min后，加入培养管，离心10 min，取出沉淀的细胞，显微镜下计数，上下限不超过10%，否则重新计数。细胞计数的上限、平均数和下限采用95置信水平的数理统计，通过细胞计数计算相对增殖度（RGR）。标准规定将RGR值换算成0-5级响应来评估材料毒性程度。结果评价：实验结果为0级反应合格；实验结果为二级反应，应结合细胞形态分析，综合评价；实验结果为3-5级反应不合格。对于短期肌内植入实验，选择了12只健康的新西兰兔，体重2.kg。术前将大腿外侧10cm15cm区域的兔毛剪掉，以免损伤皮肤。麻醉消毒后磷酸钙人工骨，在大腿外侧中间等距选择2个植入点，每点间隔2cm。一侧植入CPC骨块，另一侧植入对照样品（市售“奥斯汀”人工。

人造骨插入肌肉深度1厘米；逐层缝合、切开观察植入部位皮肤反应。术后14、28日处死6只实验兔，解剖后肉眼观察植入部位皮下及肌肉异常情况。将包裹样品周围 0.cm 的肌肉组织切割并用 10%（体积分数）甲醛溶液固定。组织病理学检查：固定组织石蜡包埋切片，HE染色，每次染色制作2个组织切片，光镜下观察磷酸钙人工骨，比较供试品和对照品周围组织反应。炎症分级和纤维囊形成分级按照肌肉植入实验炎症分级标准和纤维囊性分割标准进行。判断标准：植入后炎症反应程度不大于14级，囊腔形成至少为1级；植入后28级，炎症反应程度不超过1级，囊腔形成至少1级。供试品和对照品的组织学观察和比较表明，供试品反应程度超过对照品的组织切片数量不超过1/1。性别组和试验组细胞形态正常，贴壁生长良好，细胞排列稀疏，呈菱形细胞。或不规则三角形（图阳性组细胞全部死亡。计数：阴性组，供试品相对增殖度为100天，阴性组和供试品组细胞形态正常，贴壁生长良好, 细胞充满70%~80%, 底部细胞形态呈菱形、不规则三角形或, 相对增殖率为110%. 实验组与阴性对照细胞形态无差异各时间组细胞屈光度好，无碎屑、颗粒，未见细胞变形、萎缩、坏死。结果显示