美国西南大学荣昌校区畜禽血常规检验演示兽医临床常用的抗凝剂

西南大学荣昌校区畜禽血常规检测报告第一页，共41页。内容 实验目的和要求 1.采血和抗凝 2.检查血细胞计数。 3.第2页，共四十一页。目的和要求 掌握动物血样的采集和抗凝方法。掌握血红蛋白测定、红细胞、白细胞计数的操作方法及注意事项。第三页，共四十一页。 一、血样采集与抗凝1、血样采集 ①采血前的准备工作：采血需提前消毒、干燥。采血部位应定期进行剪毛和消毒。 ②通常从耳尖、冠顶、静脉远端采集少量血液。 ③ 大型动物可从颈静脉采集大量血液；来自猪的前腔静脉；对于鸟类，从翼内静脉，必要时通过心脏穿刺。小动物一般使用心血。第四页，共四十一页。各种动物采血部位 动物品种采血部位 动物品种采血部位 颈静脉马、牛、羊耳静脉猪、羊、狗、猫、实验动物前腔静脉猪翼臂下静脉家禽隐静脉犬、猫、羊蹼 静脉注射 鸭、鹅 前肢 头静脉 狗、猫、猪梳或雪纳瑞 心兔、家禽、豚鼠 断尾猪、实验动物 第 5 页，共 41 页。第 6 页，共 41 页。 2、血样的抗凝 兽医临床常用的抗凝剂，使用方法及图解见下表。抗凝剂抗凝机制常用浓度使用方法使用肝素阻止凝血酶转化为凝血酶并阻止血液凝固~0.2ml。

适用于大多数血液实验室诊断测试，不适用于血涂片检查。柠檬酸钠（Sodium Citrate）与钙离子形成非离子可溶性化合物，防止血液凝固3.8%溶液每10ml血液中加入1ml。适用于血沉和输血的抗凝，但不适用于血液生化指标的测定。 EDTA-Na2螯合血液中的钙离子，防止血液凝固 10%溶液 每10ml血液中添加0.1～0.2ml。适用于一般血液学检查，不适合钠、钙的测定。草酸盐混合物（草酸铵+草酸钾）与钙离子结合形成不溶性草酸钙，防止血液凝固 1-2%草酸盐溶液 先将此溶液用作抗凝剂瓶。 1ml该溶液可抗凝10ml血样（抗凝瓶应低于80℃）。毒性抗凝剂不能用于输血，也不应用于白细胞计数和血小板计数的分类。肝素 第 7 页，共 41 页。 血液学检查项目和采血后可储存的时间 测试项目储存时间 (h) 测试项目储存时间 (h) 白细胞计数 2 至 3 血红蛋白含量 48 红细胞计数 24 血细胞比容24 血小板计数 1 红细胞沉降率 2 至 3 网织红细胞计数 2-3 WBC 分类计数 1-2 第 8 页，共 41 页。二、红细胞计数（RBC）：显微镜计数法1、原理血后稀释200倍后装入血细胞计数器，用显微镜观察，计数一定体积内的红细胞数，换算成每升血液中的红细胞数。

2、设备和试剂改良的 Neubach 计数板、盖玻片、Thali 移液器、5ml 移液器、试管、玻璃棒、显微镜、计数器、0.85% 氯化钠稀释剂。第 9 页，共 41 页。3、方法① 用 5 ml 移液器准确吸取 2 ml 稀释液到试管中，用 Saley 移液器吸取 10 微升血样，擦去试管上多余的血液用脱脂棉将萨利吸管的外壁插入试管底部。将血液轻轻压入稀释液中，然后用上清液吸吹数次，洗去Thali氏管内的粘附血细胞。充分混合，以备后用。 ② 用小玻璃棒取一滴稀释后的血样，放在计数板与盖玻片的交界处边缘，让其自然浸入，使稀释后的血样扩散到计数室中，静置2～3分钟进行显微镜检查。 ③用低倍显微镜数中央大正方形的四个角和中间的5个中间正方形的红细胞数，共80个小正方形。为避免重复和遗漏，计数应按一定顺序进行。注意压在双线上的红细胞，遵守“数左不数右，上数不下数”的计数规则。第十页，共四十一页。 4、计算方法每立方毫米血液中的红细胞总数=中间5个正方形的红细胞数×5×10×200×106=中间5个正方形的红细胞数×1010单位：每升×5——5个中国方格换算为1个大方格×10——1个大方格的体积为0.1微升，换算为1.0微升×200——稀释度血液系数× 106 — 从微升转换为升。注意抗凝、抗溶，正确取样。

第11页，共41页。5、正常参考值 除山羊外，健康动物的红细胞数约为6.0×1012～8.0×1012/L . 6、临床意义①相对增加：脱水、急性胃肠炎、肠道便秘、渗出性胸膜炎、渗出性腹膜炎、某些传染病； ② 绝对增高：红细胞增多症，见于代偿性功能不全性心脏病和慢性肺病； ③减少：各种贫血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性贫血、营养不良性贫血、继发性贫血。第 12 页，共 41 页。三、白细胞计数（WBC）：显微镜计数法1、原理：用白细胞稀释液破坏红细胞后，混合均匀后装入计数槽，计数显微镜下一定体积内的白细胞数量，再换算得出每升血液中的白细胞总数。 2、试剂和设备：改良Newbass板、盖玻片、Thali氏吸管、1ml吸管、试管、小玻璃棒、显微镜、计数器、白细胞稀释液（2%冰醋酸溶液或1%盐酸溶液）。第 13 页，共 41 页。 3、方法：用1ml吸管吸取4ml白细胞稀释液0.到小试管中，然后用Thali氏吸管吸取血样至20微升，擦去吸管周围多余的脱脂棉红细胞体积分布宽度偏低，然后将吸管插入小试管底部，缓慢放出血液，反复用上清液冲洗数次，将粘附在试管上的血液冲洗干净，混匀摇匀，置放在一边。

取样计数方法与红细胞计数方法相同。计数计数室四个角的四个大方块中的白细胞数量。第14页，共41页。4、计算方法：每升血液中的白细胞总数=四个大方格中的白细胞数量÷4×10×20×106 单位：个/升5、注意事项：初学者容易将灰尘和异物与白细胞混淆，可以用高倍显微镜观察。白细胞具有细胞核结构，而尘埃异物形状不规则，没有细胞结构。第15页，共41页。5、正常参考值（附表）6、临床意义①升高：细菌感染、炎症、白血病、恶性肿瘤、毒性疾病。 ② 减低：病毒性传染病、犬瘟热、猫泛白血病减低、各种晚期疾病；再生障碍性贫血;药物性还原：磺胺类、氯霉素、青霉素、链霉素、氨基比林、水环酸钠等；血原虫、血子孢子。第16页，共41页。各种健康动物血红蛋白计数、红细胞计数和白细胞计数参考值 Animal Hb/(g L-1) RBC/(1012 L-1) WBC /(109 L-1)@ > 布法罗 123.0±16.6 5.91±0.98 8.04±0.@ >30 清道夫 95. 5±10.0 7.24±1.57 8.43±2.08 乳制品 83.@ >7±7.0 5.97±0.86 9.41±2.13 羊 92.6±5.1 8.42±1.20 8.45±1.90 山羊 118.0±10.3 15.23± 1.03 12.47±0.90 猪 112.3±13.7 5.51±0.31 1 3.7@>02±0.93 狗 133.6±13.5 6.57±0.34 10.93± 1.29 鸡 83.7@>9±30.4 3.04±0.28 / 有关信息，请参阅：安丽英编辑。兽医实验室诊断。中国农业大学出版社. 2000: 2< @5.第 17 页，共 41 页。

第 18 页，共 41 页。第 19 页，共 41 页。自动血液分析仪测试多种动物有狗、猫、马、牛、羊、猴、老鼠等 12 种动物检测模式，以及四种用户自定义的检测模式模式。适用范围 宠物医院动物检疫科、畜牧兽医医院、动物园、科研机构实验中心第20页，共41页。操作简便嵌入式标本处理和测量单元新型高精度血液处理技术，抗凝全血< @9.6μl试剂自动添加，可直接感应试剂剩余量红细胞体积分布宽度偏低，方便20个检测结果和WBC、RBC、PLT直方图同屏显示9.6μl抗凝剂只需按“ count”，分析结果将被吸收。可靠的界面鼠标操作，手动调节参数，配套动物血液检测专用试剂，报告打印功能。 21页，共41页。主要技术参数工作原理：电阻抗法、氰化物高铁血红蛋白法和无氰SFT法检测参数：三组白细胞，23个参数（包括WBC、RBC、PLT颜色直方图） 标准用量：9.@ >6μl （全血模式）20μl（预稀释模式）检测速度：≥40个样本/小时，可开启24小时自动休眠和唤醒功能结果存储：主机自动存储12000个样本的所有参数，包括直方图、历史数据管理查询更方便操作语言：全中国动物种类：狗、猫、马、牛、羊、猴、鼠等八四种用户自定义模式质量控制模式：X-B、L-J、、SD ，CV标准模式：自动校准和手动校准显示：大屏幕彩色液晶显示，640480分辨率信息：支持多种快速中文输入接口：1个并行打印机接口，2个USB接口，2个PS/2 i接口，两个RS232接口（支持组网）电源：AC220V 50HZ 第22页，共41页。

Blood Routine Test Sheet “Blood Routine”主要包括四个指标：白细胞计数（WBC count）、红细胞计数（RBC count）、血红蛋白（HB）和血小板计数（PLT count）。白细胞（WBC）的数量反映了机体抵抗和杀死病原微生物的能力强弱。如果减少通常是由于病毒感染、再生障碍性贫血、伤寒或疟疾、营养不良、极度疲惫，以及脾功能亢进和自身免疫性疾病。增加的主要原因是急性化脓性感染、炎症的存在、严重的组织损伤和血细胞大量破坏、急性出血和溶血、白血病和一些肿瘤。 RBC和HB分别是红细胞和血红蛋白，是反映贫血的两个指标。出现贫血、白血病、失血等情况时会减少；出现呕吐、腹泻、缺氧、心肺疾病时会加重。红细胞（RBC）计数，增加的病理原因有严重肺气肿、肺心病、真性红细胞增多症、慢性一氧化碳（CO）中毒等。减少的病理原因包括缺铁性贫血、溶血性贫血、营养不良性贫血、再生障碍性贫血和出血性贫血。血红蛋白（HB），其病理原因与“红细胞计数”相同，但在各种贫血中，由于红细胞和血红蛋白的含量不同，两者的降低程度可能不一致。因此，同时测定红细胞和血红蛋白对于鉴别贫血类型具有重要意义。血小板计数（PLT）在止血和凝血中起着非常重要的作用。

正常畜禽每日血小板计数有一定波动。下午高于上午，高原地区高于平原地区，孕中后期高，产后1-2天低；它在剧烈活动和进食后增加，然后休息，然后恢复到原来的水平。如果低于正常值，应引起重视，因为降低常见于急性白血病、难治性贫血、脾功能亢进、弥散性血管内凝血等；溶血性贫血和急性化脓性感染增加。第 23 页，共 41 页。当血常规的这些指标偏离正常值范围（高或低）时，表明受试者的身体发生了一些病理变化。如果HGB值低于正常值，说明有贫血，应该进一步检查是哪种贫血。如果 HGB 值高于正常值，可能是由于血红蛋白升高或血液浓缩所致。白细胞代表身体的防御系统功能。当总数增加时，通常表明存在炎症和感染。此时，大部分患病动物都有发热症状。如果WBC值过高并伴有严重贫血，则需要进一步进行骨髓活检以排除白血病的可能。 WBC值低于正常值，可能是由于接触辐射、病毒感染药物和化学中毒引起的。当PLT下降时，可能会出现出血，如血小板减少性紫癜；当它增加时，表明血液处于高凝状态，容易形成血栓。当其他检查项目出现异常时，也说明体内有病。

第 24 页，共 41 页。血细胞直方图一、WBC 直方图：是反映 WBC 大小的频率分布图。正常人WBC柱状图有两个明显分开的峰，左峰是小细胞群（主要是淋巴细胞），右峰是大细胞群（主要是中性粒细胞），中间的细胞群在两个峰之间（包括嗜酸性粒细胞） 、嗜碱性粒细胞、单核细胞）。小细胞群峰高且陡，大细胞群高且宽，中间细胞群一般为具有一定宽度的平坦区域。小细胞群峰值越高，淋巴细胞比例越大；大细胞群峰值越高，中性粒细胞比例越大； ，中间细胞群的峰值增加。如白血病，外周血中出现大量未成熟细胞，多分布于中间细胞群及其附近，增加峰尖，针对不同白血病类型呈现特异性直方图。 二、RBC直方图：是反映RBC大小或任何与RBC大小相当的大小范围的分布图。正常的红细胞直方图是一条偏斜的分布曲线，峰值代表一定数量红细胞体积的平均值，与平均红细胞体积基本相同。正常人的峰值一般在82-94fl之间。直方图峰值变低，基底部分变宽，说明红细胞大小不同，与红细胞分布增加一致。直方图左移表示红细胞体积较小。如缺铁性贫血患者红细胞直方图明显左移，基数明显增宽。直方图向右移动，表明红细胞体积较大，如在巨幼细胞性贫血和新生儿中所见。

有时红细胞直方图中会出现双峰，这是有效治疗贫血的证据。多见于治疗后缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血患者。 三、PLT直方图：是反映PLT体积大小分布频率的分布图。正常的PLT直方图左偏，峰值一般在6-10fl之间。直方图左移表示 PLT 体积过小。柱状图向右移动，表明 PLT 的体积过大。直方图尾部抬高或在20-30fl出现另一个峰值，表明血液中可能有更多的小红细胞、红细胞碎片、巨血小板、血小板聚集和纤维蛋白。缺铁性贫血患者PLT直方图尾部明显升高，PLT下降，治疗过程中直方图多呈波浪状。二十五页，共四十一页。 Diagram ThemeGallery 是由 Guild Design Inc. 开发的设计数字内容和内容商城。标题添加您的文本 ThemeGallery 是由 Guild Design Inc. 开发的设计数字内容和内容商城。第 26 页，共 41 页。循环图文本文本文本文本循环名称添加您的正文第 27 页，共 41 页。

图表文本 文本 文本 添加您的标题 文本 文本 1 文本 2 文本 3 文本 4 文本 5 添加您的标题 文本 文本 1 文本 2 文本 3 文本 4 文本 5 文本 文本 第 28 页，共 41 页。图表概念 添加您的文本 文本 文本 文本Text Text Text 第29页，共41页。西南大学荣昌校区