【每日一题】Caspase胶质细胞凋亡

标题解释：

神经生长因子：作为神经生长因子家族的一员，可调节氨基酸和小分子的摄入，增强功能蛋白和结构蛋白的合成氨基酸拮抗，在神经系统和神经的发育中发挥重要作用细胞再生。中枢神经系统受损后，增加的神经生长因子通过拮抗兴奋性氨基酸的毒性作用，维持神经细胞内钙离子浓度的稳定，激活蛋白激酶活性，有效阻断中枢神经系统受损引起的神经细胞凋亡. ，对神经细胞起到保护作用。

少突胶质细胞凋亡：当中枢神经系统的少突胶质细胞发生凋亡时，由它组成的髓鞘会失去维持自身功能结构所需的髓鞘糖蛋白等必需营养物质，从而产生髓鞘。发生髓鞘层破裂和解体等组织病理学变化。少突胶质细胞凋亡在多发性硬化脱髓鞘发病机制中多见于复发-缓解型，发生率约为30%。Caspase家族作为许多凋亡途径的汇聚点氨基酸拮抗，在细胞凋亡的调控中发挥着关键作用。

背景：神经生长因子对正常神经元凋亡具有抑制作用，可提高其损伤修复能力，对一些自身免疫性疾病具有治疗作用。

目的：观察外周转染重组腺病毒介导的神经生长因子基因对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠少突胶质细胞凋亡和髓鞘形成的影响。

方法：30只雌性健康C57BL/6小鼠随机分为3组，每组10只：正常组不做任何处理；对照组采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽免疫法建立。免疫性脑脊髓炎模型于造模后第3天尾静脉注射生理盐水，连续注射21天。转染组亦建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型，转染组于造模后第3天尾静脉注射。连续注射重组腺病毒介导的神经生长因子基因21天。小鼠在疾病高峰期被处死，用LFB染色观察髓鞘的形态和病理。免疫荧光法观察脊髓组织中凋亡蛋白Caspase3与少突胶质细胞的表达及共定位。RT-PCR方法用于检测脊髓组织。Western blot法检测神经生长因子和髓鞘碱性蛋白mRNA水平，Elisa法检测脊髓组织中神经生长因子和Caspase3蛋白水平。实验操作流程通过西南医科大学动物实验伦理审查（201912-8). RT-PCR方法用于检测脊髓组织。Western blot法检测神经生长因子和髓鞘碱性蛋白mRNA水平，Elisa法检测脊髓组织中神经生长因子和Caspase3蛋白水平。实验操作流程通过西南医科大学动物实验伦理审查（201912-8). RT-PCR方法用于检测脊髓组织。Western blot法检测神经生长因子和髓鞘碱性蛋白mRNA水平，Elisa法检测脊髓组织中神经生长因子和Caspase3蛋白水平。实验操作流程通过西南医科大学动物实验伦理审查（201912-8).

结果与结论：①LFB染色显示对照组脊髓组织有明显脱髓鞘改变，转染组脱髓鞘明显改善；②免疫荧光显示对照组脊髓组织少突胶质细胞Caspase3明显升高。点状聚集，转染组聚集现象不明显；③ RT-PCR检测显示，与正常组和转染组相比，对照组髓鞘碱性蛋白和神经生长因子的mRNA表达降低（P<0. 05);④Western印迹分析显示，与正常组和转染组相比，对照组Caspase3蛋白水平升高（P<0.0< ⑥结果表明，外周转染重组腺病毒介导的神经生长因子基因对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型具有预防作用。其机制可能与神经生长因子水平的上调和少突胶质细胞的下调有关。凋亡蛋白Caspase3、增加髓鞘碱性蛋白的表达，改善脱髓鞘。⑥结果表明，外周转染重组腺病毒介导的神经生长因子基因对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型具有预防作用。其机制可能与神经生长因子水平的上调和少突胶质细胞的下调有关。凋亡蛋白Caspase3、增加髓鞘碱性蛋白的表达，改善脱髓鞘。

（李作孝）

中国组织工程研究杂志出版重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养; 成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松症; 组织工程

关键词: 实验, 动物, 小鼠, 神经生长因子, 腺病毒, 自身免疫性脑脊髓炎, 少突胶质细胞, 髓磷脂, 凋亡, 蛋白质

引用本文：谢阳、吕志宇、张树江、龙婷、李作晓。重组腺病毒介导的神经生长因子转染实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型中少突胶质细胞的凋亡和髓鞘形成[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3678-3683.