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最常见的存储温度可分为以下试剂的短期存储

时间:2022-07-22 16:02:37来源:网络整理

生物材料的定期储存对于任何实验室都极为重要。

如果在室温下储存,生物样品会随着时间的推移逐渐降解。即使在低温下,重复冻融循环后样品的完整性也会受到影响。各个样品和试剂的最佳储存温度将根据生物材料的类型、使用的溶剂、具体应用和储存时间而有所不同。最常见的储存温度分为以下五类:

•室温

•冷藏

•冷冻

•超低温冷冻

•低温冷冻

1. 室温储存,15ºC 至 27ºC

经过防腐剂固定的生物材料(例如,石蜡包埋的组织或生物样本),例如 Bounn 福尔马林或乙醇,通常可以在温度受控的环境中室温保存。虽然室温储存对于需要读取分子数据的样本来说并不理想无水乙醇 存储室温,但在保存或干燥后,仍然可以从室温储存的组织中获取 DNA 信息。然而,这些组织中的 DNA 通常会被高度降解,只能读取短片段。 RNA 在室温下降解更快,因此通常无法将其从未冷冻保存的组织中分离出来。

2. 冷藏无水乙醇 存储室温,2ºC 至 5ºC

冷藏不适合长期储存。然而,对于酶和抗体等生物试剂的频繁使用和短期储存,冷藏是最佳选择。在常规实验使用中反复冷冻和解冻此类试剂会迅速损害其完整性。在制造商推荐的冷藏期限内使用时,通常可以保证完整性。短时间内不能用完的生物材料,可根据需要分装冷冻保存,减少冻融循环次数。

3. 冷冻储存,-20ºC

有许多生物材料可以在标准冷冻温度下储存,最好是在没有除霜循环的设备中(除霜循环需要短时间解冻以防止结霜,这会导致生物材料降解)。 -20ºC 冷冻储存是短期储存在较高温度下不稳定的样品和试剂的理想选择。一般来说,如果组织在冷冻前悬浮在稳定溶液中,冷冻后仍可从中提取 DNA 和 RNA。如果计划长期储存或组织细胞没有悬浮在稳定溶液中,则优选较低的温度。

4. 超低温冷冻储存,-80ºC

在实践中,经常选择超低温-80ºC冰箱来长期储存生物材料。超低温可以防止核酸、蛋白质、内分泌分子和许多其他生物分子的降解,并且可以长时间保持许多生物测定和试剂的活性。在进行低温储存时,必须仔细规划冻融方案。通常,缓慢冷冻(每分钟降低 1ºC)和速溶溶液(例如水浴)可以最好地保存细胞。

5. 低温冷冻储存,-150ºC 至 -190ºC

低温储存通常被认为是生物样品长期保存的黄金标准。在这些极低的温度下,所有生物活性都被暂停,因此不会发生降解。非常适合无法保存的敏感样品。然而,与低温一样,在进行低温储存时,冻融方案的规划也很重要。

可见,在选择生物材料的理想储存温度时,需要考虑很多因素。就试剂和生物测定而言,最好遵循制造商关于短期和长期储存的建议。

在保存珍贵样本时,以下三个注意事项尤为重要:

1.样品的分子结构

2.使用的防腐剂或溶剂

3. 未来研究所需的生物完整性程度。

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