最新新闻:

二甲基亚砜溶液 【知识点】冷冻细胞的步骤与步骤

时间:2022-04-28 15:57:00来源:网络整理

CAS:

67-68-5

英文名:

DMSO(二甲基亚砜

纯度:

>99.5%

二甲基亚砜,英文名DMSO。常用于溶解试剂。二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO),常温下为无色、无味、透明的液体。它是一种吸湿易燃液体。具有稳定性高、沸点高、热稳定性好、非质子性、水混溶性等特点。溶于乙醇、丙醇、苯、氯仿等大多数有机物质,被称为“万能溶剂”。

二甲基亚砜(DMSO)不能使用PS、PVC、PC料容器,应使用LDPE、HDPE、PP料容器。

DMSO 是一种非质子极性溶剂,常用于化学反应、PCR 反应以及作为玻璃化冷冻保护剂用于保存细胞、组织和器官。 DMSO 用于细胞冷冻培养基中,以保护细胞免受冰晶造成的机械损伤。也可用于主培养、继代培养、重组非整倍体、杂交瘤等系列细胞系、胚胎干细胞(ESC)和造血干细胞的冷冻保存。也经常与 BSA 或 FBS 混合。

用途:

(1)DMSO广泛用于人、动物细胞系和λ噬菌体的冷冻保护。制备用于冷冻细胞的DMSO溶液的步骤如下:

1)冷冻培养基的制备:含有细胞培养用培养基、10-20%血清和5-10% DMSO;

2)用胰蛋白酶或其他合适的方法消化贴壁细胞; (细胞最好处于对数生长期)

3)低速离心(4℃,250×g,10分钟)收集细胞,吸出培养基;

4)用冷冻培养基悬浮细胞,使细胞密度达到106 -107个/ml;

5)细胞均匀分布,置于冷冻管中;

6)按照标准冷冻保存程序在 -70 °C 或更低温度下冷冻细胞;

(2)细胞融合后二甲基亚砜溶液,在40-50% PEG溶液中加入10% DMSO;

(3)文献报道DMSO作为缓冲液成分用于以下实验:Poly(A+) RNA的纯化、大肠杆菌感受态细胞的转化、PCR反应、扩增cDNA文库、DNA测序、DEAE-葡聚糖介导的细胞转染和聚凝胺介导的DNA转染;

(4)描述了相应的程序,用DMSO回收膜过滤的DNA,用于后续的PCR扩增反应;

(5)用于 DNA 测序的毛细管电泳 将 5% DMSO (v/w) 混合到 2 M 尿素中,如果需要,将 DMSO 浓度调整到 100%。

(6)有研究报道了不同浓度DMSO与寡核苷酸熔点温度的关系;

(7)一项研究描述了使用 DMSO 来增加杂交瘤细胞中单克隆抗体的产生;调查发现,杂交瘤细胞在低温冷冻前用含有 DMSO 的培养基在高温下培养。

(8)文献报道使用DMSO修饰蛋白质中的磷酸丝氨酸和磷酸苏氨酸残基,用于磷酸化状态的质谱(MS)分析;

(9)文献中关于亮丙瑞林在水中和DMSO中降解的报道;

溶解度:

• 完全混溶:LDPE、HDPE、聚丙烯、PPCO,

聚甲基戊烯、尼龙、聚四氟乙烯FEP

• 适度混溶:聚苯乙烯、ECTFE/ETFE

• 不混溶:聚砜、柔性和刚性 PVC 管材、聚碳酸酯

注意事项:

仅供实验室使用二甲基亚砜溶液,不得用于制药、家庭和其他用途。

使用说明:

DMSO 很容易与水 (1 ml DMSO + 1 ml H2O) 混合,形成清澈、无色的溶液。易吸潮,避免受潮。也溶于乙醇、丙酮、乙醚、苯、氯仿;

存储/稳定性:

二甲基亚砜

在室温下容易过冷和缓慢熔化,产品应以固态而不是液态接收。固化后的DMSO可在室温下再次液化而不会损坏自身。一种热稳定化合物,在酸、碱和中性溶液中稳定,温度高达 100 °C。温度接近其沸点(189°C),在碱性和中性溶液中保持稳定。 150℃加热24h,纯度损失小于0.1%。

声明:文章仅代表原作者观点,不代表本站立场;如有侵权、违规,可直接反馈本站,我们将会作修改或删除处理。

猜您喜欢

图文推荐

热点排行

精彩文章

热门推荐