“印迹”《肌动蛋白抗体测定免疫印迹法》意见征求

今天，聚焦化工小新为大家分享来自化工仪器网的《《肌动蛋白抗体测定免疫印迹法》意见征求》。

有研究表明，肌动蛋白可以进入循环系统如血液、脑脊液及其他生物体液，如淋巴液、尿液、支气管肺泡灌洗液中，不仅可以作为细胞损伤的标志物,而且可能有直接的致死效应。而F-肌动蛋白可作为一种自身抗原，参与自身免疫性疾病的发生发展，疾病相关抗肌动蛋白抗体也可作为多种疾病的预后生物标志物，为疾病诊断提供可信赖的依据。

进一步研究肌动蛋白在细胞外的存在形式及其在生理与病理反应过程中的作用，不仅仅对基础医学，更是对许多重大疾病的诊断、预防及治疗有重要意义。为此，中国测试技术研究院、正能生物、中国测试技术研究院生物研究所、青岛科技大学等单位在国家标准化管理委员会的主管下，起草编制了《肌动蛋白抗体测定免疫印迹法》。日前，该标准已经编制完成，如今正面向社会征求意见。意见征求时间截止至2020年6月8日。

阅读标准征求意见稿后可知，《肌动蛋白抗体测定免疫印迹法》引用了GB/T6682《分析实验室用水规格和实验方法》，规定了基于免疫印迹法的肌动蛋白抗体表现分子量测定、效价验证、物种反应以及稳定性试验。

据悉，免疫印迹法原理是SDS与蛋白质分子结合形成带负电荷的蛋白质SDS复合物。在电场的作用下，蛋白质SDS复合物向带有异向电荷的电极移动。根据聚丙烯酸胺凝胶分子筛效应，复合物迁移速度与其分子量成负相关。将电泳分离的组分转移并固定在化学合成膜等固相载体后，以特定的免疫反应以及显色系统分析印迹。

免疫印迹法需要的仪器设备有电子天平、垂直凝胶系统、转移系统、电泳仪、离心机、均质器、硝酸纤维膜、旋涡振荡器、扫描仪和离心管。该方法的步骤如下：称取1mg蛋白粉末加入1mL蒸馏水中溶解，使母液浓度为1mg/mL；将长满CHO细胞的培养瓶放置在冰上，用吸液管吸出培养液，加入足够的冷的PBS在培养瓶中充分洗涤细胞表面；向培养瓶中加入冷的NP-40裂解液，然后用细胞刮子沿着瓶壁开始刮细胞；重复第一个步骤以尽可能多的收集到细胞裂解液到离心管中；取出少量细胞裂解液测定蛋白浓度分装保存在-70℃；电泳至溴酚蓝到达分离胶底部；后对其进行印迹、免疫反应。

我国现行的法规和标准中，没有关于肌动蛋白抗体测定免疫印迹法的标准，而本标准填补了肌动蛋白抗体测定免疫印迹法检测指导文件、技术操作细节的缺失，相信本标准能对肌动蛋白抗体测定免疫印迹法检测提供更为准确、快速、规范的法则以提高检测工作效率和降低检测成本。

更多详情请点击：《肌动蛋白抗体测定免疫印迹法》征求意见稿

好了，关于“印迹”《肌动蛋白抗体测定免疫印迹法》意见征求就介绍到这。