牛血清中的白蛋白冷乙醇法条件frombovine

时间：2022-07-24 14:01:02来源：网络整理

牛血清白蛋白，BSA，是牛血清中的一种简单蛋白质，血液的主要成分（38g/100ml），分子量66-68kD，等电点4.8，含氮量为16% , 含糖量0.08%。仅含有己糖和己糖胺，并且仅含有 0.2% 的脂肪。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸形成17个二硫键，在肽链的第34位有一个游离的巯基。白蛋白可以与多种阳离子、阴离子和其他小分子结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压的作用，贡献80%的渗透压、pH缓冲、营养和载体，并可携带多种物质进行循环，包括脂肪酸、金属离子、胆红素、激素和药物等。

图 1 。 BSA分子模式

牛血清白蛋白，BSA，又称组分V，或Cohn V，名称来源于BSA分馏法Cohn冷乙醇法，Cohn法仍然是一种非常常见的BSA分馏方法，除了冷乙醇法，目前主要的热激法和色谱法。

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图2.几种常见的 BSA 分离方法

一、科恩冷乙醇法

Cohn 冷乙醇法是哈佛大学 Edwin Cohn 教授于 1946 年发明的。基于对注射级蛋白质治疗战伤的大规模需求，Cohn 教授改变了血浆的乙醇浓度和 pH 值在较低的温度下。，从而使其中所含的蛋白质在不同的乙醇浓度下沉淀出来。第五降水组分中的主要组分是BSA，因此BSA也称为组分V或Cohn V。

图3.科恩冷乙醇法条件

Cohn 法是一种早期的 BSA 分馏方法，为后续的 BSA 分馏提供了重要的思路。然而，在Cohn法的过程中，血浆蛋白涉及乙醇和低pH酸的变性，以及各种杂质的干扰。质量差，与其他更先进的分馏方法相比存在许多问题：

BSA蛋白变性、片段化、活性低；

BSA纯度低，杂质含量高；

牛血清白蛋白产量低；

适用于一般实验，但难以用于细胞培养。

二、热冲击

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