【知识点】一种猪血提取血浆蛋白粉的技术实现步骤摘要

本发明专利技术提供了一种从猪血中提取血浆蛋白粉的方法，包括以下步骤：制备抗凝猪血；血浆和血细胞的分离；血浆沉淀收集凝血酶原；粗制凝血酶溶液的制备；制备精细凝血酶；血细胞壁破裂和溶血；血球蛋白的片段化酶水解；猪血水解蛋白的制备。本发明专利技术的有益效果是：该方法制备的猪血水解蛋白的氨基酸含量占蛋白质的90%以上，易于吸收利用，原料为充分利用，一次喂料可生产两种高附加值产品。整个生产过程避免使用剧毒有机溶剂，克服产品清单中溶剂残留等缺陷，降低生产成本。

下载所有详细的技术数据

【技术实现步骤总结】

专利技术属于生物活性物质的分离提取

，尤其涉及。

技术介绍

猪血是一种营养学家称之为液态肉的优质蛋白质。猪血几乎含有人体所需的全部营养物质：蛋白质、氨基酸、维生素、糖类，以及钠、钾、铁、钙等人体不可缺少的微量元素。其中，蛋白质18.9%，非蛋白质生物1.2%，矿物质0.9%，水79%，另外其氨基酸组成均衡，含8人体所需的各种必需氨基酸总量高于人乳和全蛋，尤其赖氨酸含量高达9%，符合联合国粮食及农业部推荐的模式组织和世界卫生组织（FA0/WH0)专家组。一个资源大国，但在猪血资源的开发利用上却落后于许多发达国家。因为简单加工的猪血蛋白不是容易消化吸收，颜色较深，血腥味重，适口性差，因此，长期以来蛋白质粉提取技术，很多猪血作为垃圾倒入沟里，不仅会造成巨大的浪费，还会污染环境国外动物血的发展始于上个世纪之初进入，最初主要用于饲料行业。随着高新技术的发展，国内外许多研究部门对动物血的使用给予了特别的重视。通过生化技术加工的猪血用于食品、医药等方面的研究。目前，血液制品已形成一定规模。在保健品行业，产业化前景良好。近年来，我国猪血的深入发展取得了重要进展。作为营养宝库，它已被广泛研究，提出了数十种加工生产工艺。从直接食用猪血豆腐，到酶解猪血粉和复合氨基酸粉的生产，取得了长足的进步。但它仍然不能满足人类的需要。问题是大部分的工序都不是很完善，比如有些工序耗能大，耗时长，有些工序只能生产单一产品，有些工序良率低，有些工序用的很多有机溶剂，存在环保缺陷等。专利技术方法克服了上述缺点，专利技术提供了一种利用猪血同时生产凝血酶和猪血水解蛋白的零排放绿色方法。

技术实现思路

本专利技术的目的是提供和解决上述一种或多种现有技术。该专利技术提供，包括以下步骤： 1）制备抗凝猪血：取检疫合格的新鲜猪血蛋白质粉提取技术，放入第一个容器中，其中0%柠檬酸钠，1.0% EDTA二钠， 1.0% EDTA二钾、0.6%六偏磷酸钠和0.8%焦磷酸钠组合物的抗凝剂，搅拌均匀，在7~8°C下，罐装42h；猪血上层为无色透明液体，为血浆，下层为暗红色粘稠液体，为血细胞。采用虹吸法将上层血浆吸入第二个容器；剩余血细胞以2500r/min离心后，将上层血浆合并到第二个容器中。第二个容器低温冷冻备用，血细胞冷冻保存在第三个容器中过夜；混合后用0.9%生理盐水稀释，低温静置过夜，收集沉淀，得凝血酶原； 4)凝固酶粗液的制备：将收集的凝血酶原沉淀溶解在pH值7.0的磷酸盐缓冲液中，用1.0%CaCl2溶液活化凝血酶原，过滤收集滤液得到粗制凝血酶溶液； 5)细凝血酶的制备：粗凝血酶溶液用孔径为1.2nm的纳滤膜处理，以原体积的1/25-1/30收集渗余液浓缩后，将截留液进一步喷雾干燥，得到血浆蛋白粉；6)血细胞破壁溶血：在第三个容器中加入与血细胞体积中的适量生理盐水，制成液体中蛋白质含量为20%，加热至60℃，超声处理12min； 7)血细胞蛋白裂解酶解：用4.0moI/L NaOH调pH值至8.0，升温至40-45℃，加入适量沙雷肽酶，孵育2小时，然后加入加热至50°C并保持3小时；调节pH至9.0，加入适量复合蛋白酶，保持4小时，使血球蛋白充分水解； 8)猪血水解蛋白的制备：酶解结束后冷却至室温后，用0.20um滤膜过滤除菌，制成猪血水解蛋白液体，然后喷雾干燥制成血红蛋白粉的液体。

该专利技术的有益效果是：该方法得到的猪血水解蛋白中氨基酸含量占蛋白质的90%以上，易于吸收利用，充分利用原料，一次喂料可生产两种高附加值产品。整个生产过程避免使用剧毒有机溶剂，克服产品清单中溶剂残留等缺陷，降低生产成本。在一些实施例中，在步骤6)中，超声处理的条件为超声功率250W。在一些实施例中，在步骤7)中，复合蛋白酶由胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶按一定比例混合而成。 【具体实施例】 本专利技术提供，下面结合实施例对本专利技术进行详细介绍： 实施例1 本实施例中复合蛋白酶由胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按一定比例混合制成。具体步骤为： 1）制备抗凝猪血：取检疫合格的新鲜猪血，放入预先加入1.0%柠檬酸钠、1.的第一个容器中. 0% EDTA二钠、1.0% EDTA二钾、0.6%六偏磷酸钠和0.8%焦磷酸钠抗凝剂，充分搅拌，7℃，罐装42h； 2)血浆、血细胞分离：7℃，罐装42h后，抗凝猪血上层为无色透明液体为血浆，下层为暗红色粘稠液体为血细胞，上层为用虹吸法将一层血浆吸入第二个容器中；剩余血细胞以2500r/min离心后，将上层血浆合并到第二个容器中。然后冷冻并储存在第三个容器中过夜； 3)血浆沉降收集凝血酶原：待第二个容器中的血浆解冻后，滤去上层漂浮的白色絮状物后，用0.用9%生理盐水稀释，静置低温恒温过夜，收集沉淀，得到凝血酶原； 4)凝血酶粗液的制备：将收集到的凝血酶原沉淀溶解在pH值为7.0的磷酸中，在缓冲溶液中，用1.0%的CaCl2溶液活化凝血酶原，过滤收集滤液，得到粗制凝血酶溶液； @1.2nm纳滤膜处理，浓缩后收集原体积1/30的截留液，再将截留液喷雾干燥，得到血浆蛋白粉；在容器中加入适量血细胞体积的生理盐水，使液体中的蛋白质含量为20%，升温至60°C，进行功率为250W的超声处理12min；4.0mol/L NaOH调pH值至8.0，升温至40℃，加入适量沙雷肽酶，孵育2小时，再升温至50℃孵育3小时;调节pH值达到9.0，加入适量复合蛋白酶，保持4小时，使血球蛋白充分水解； 8)猪血水解蛋白的制备：酶解完成后，冷却至室温，用0.20um滤膜过滤除菌，制成猪血水解蛋白液体，将液体进一步喷雾干燥制成血红蛋白粉末。实施例2 本实施例将胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶按一定比例混合制备复合蛋白酶。具体步骤为： 1）制备抗凝猪血：取检疫合格的新鲜猪血，放入预先加入1.0%柠檬酸钠、1.的第一个容器中. 0% EDTA 二钠，1.0% 乙二胺当前页 11 2 

【技术保护点】

一种从猪血中提取血浆蛋白粉的方法，包括以下步骤： 1)制备抗凝猪血：取经检疫合格的新鲜猪血，放入第一个容器中，预先添加 1.0% 柠檬酸钠、1.0% EDTA 二钠、1.0% EDTA 二钾、0.6 由 % 六偏磷酸钠和 0.组成的抗凝剂@>8%焦磷酸钠，搅拌均匀，罐装7-8℃保存42小时； 2)血浆和血细胞分离：在7-8℃8℃罐装42小时后，抗​​凝猪血上层为无色透明液体，为血浆，下层为暗红色粘性液体是血细胞。采用虹吸法将上层血浆吸入第二个容器； 2500 r/min离心后，将上层血浆合并到第二个容器中进行低温冷冻，血细胞在第三个容器中冷冻保存过夜；解冻后，滤去上层漂浮的白色絮状物，用0.9%生理盐水稀释，低温静置过夜，收集沉淀即得凝血酶原； 4)凝固酶粗液的制备：将收集的凝血酶原沉淀溶解在pH值为7.0的磷酸盐缓冲液中，用1.0% CaCl2溶液活化凝血酶原，过滤收集滤液至获得粗凝血酶溶液； 5)优质凝血酶的制备：将粗凝血酶溶液用孔径为1.2nm的纳滤膜处理。浓缩后，收集原体积的1/25-1/30，收集渗余物。将液体喷雾干燥得到血浆蛋白粉； 6)血细胞壁破壁溶血：在第三个容器中加入适量生理盐水使液体中蛋白质含量达到20%，升温至60℃，超声波处理12min； 7)血红蛋白碎裂酶解：用4.0mol/LNaOH调pH至8.0，升温至40-45℃，加入适量沙雷肽酶，孵育后2 小时，然后加热至 50°C 并孵育 3 小时；调节pH值至9.0，加入适量复合蛋白酶，孵育4小时，使血球蛋白充分水解； 8)猪血水解蛋白的制备：酶解后冷却至室温，用0.20um滤膜过滤除菌，制成猪血水解蛋白液体，再将液体喷雾干燥制成血红蛋白粉。

【技术特点总结】

【专利技术属性】

技术研发人员：徐英文，

申请人（专利权）：海安县华润食品有限公司，

类型：发明

国家省市：江苏；32

下载所有详细的技术数据我是该专利的所有者