本发明专利技术涉及一种薄层耦合气相色谱质谱联用技术分析

本发明专利技术涉及一种薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法，属于烟草检测领域。该方法包括以下步骤：1)在烟草粉末样品中加入萃取剂进行萃取、过滤，得到上清液； 2)取上清液进行薄层层析，取上清液于薄层板上 各组分斑点相互分离；3)除去组分斑点，加溶剂洗脱溶解，得溶解溶液；4)获取样品光谱；将样品光谱与标准烟雾光谱进行比较 比较并确定不同的色谱峰；根据不同色谱峰的光谱峰信息确定污染物。该方法综合利用薄层色谱法和气相色谱-质谱法对烟粉样品进行分析，通过与标准烟气样品的光谱峰比较，定性筛选出污染物。适用性强、操作简单、检测时间短。优势。

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【技术实现步骤总结】

本专利技术属于烟草及烟草制品中污染性化合物的筛选分析

，具体涉及一种薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法。

技术介绍

烟叶在生产、运输、储存过程中会受到外源物质的污染，影响烟叶的香气和口感。但是，污染烟叶是由何种物质污染，污染源来自哪里等问题气相色谱测定氨，却难以解决。

技术实现思路

该专利技术的目的是提供一种薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法，具有工艺简单、检测时间短等优点。短特征可以有效提高烟草污染物的筛选效率。为了达到上述目的，专利技术中采用的技术方案是：一种薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法，包括以下步骤：1)加入萃取烟尘样品提取过滤，得到上清液； 2)取上清进行薄层层析，得到薄层板上相互分离的组分点； 3)去除组分斑点，加入溶剂进行洗脱溶解，得到洗脱液； 4)洗脱液经气相色谱-质谱分析，得到样品光谱；将样品光谱与标准烟气样品的光谱进行比较，确定差异色谱峰；根据差异色谱峰的光谱峰信息确定污染物。薄层色谱法（TLC）又称薄板色谱法，是将吸附剂、载体或其他活性物质均匀铺展在平板上形成薄层，然后在此进行层析分离的分析方法。薄层。薄层色谱的主要操作步骤包括：薄层板的制备、样品的滴加、显影、显色、Rf值的比较和定量分析。由于样品中各组分的性质不同，在移动展开后，可以得到相互分离的组分点。气相色谱-质谱联用技术通过接口组件将气相色谱仪和质谱仪连接起来，以气相色谱作为样品分离和制备的手段，以质谱作为气相色谱在线检测方法进行定性和定量分析，辅以相应的A色谱-质谱技术，由数据采集和控制系统构成。

该专利技术是建立一种薄层色谱和气相色谱-质谱相结合的烟叶外源性物质筛查方法，为查明烟叶污染源提供了新途径。该方法利用烟样中各组分在某种物质中吸附或溶解性能的差异，或与其他物质亲和性能的差异，实现不同溶质的快速分离；薄层色谱与气相色谱-质谱联用对烟气样品中污染物的筛查具有很强的适用性，可以更好地促进傅里叶变换红外分析仪-气相色谱-质谱仪技术在烟草污染物领域的应用筛选。该方法充分利用了两种技术的优点，具有操作简单、检测时间短的特点，能有效提高烟草污染物的筛查效率。步骤1)中，萃取剂为环己烷、甲苯、丙酮、水中的任意一种或多种。进一步优选地，萃取剂是甲苯和/或丙酮。每20mL-30mL萃取剂中加入烟粉样品量1.0g；提取时，150rpm振摇30min，静置，过滤取上清液。步骤2)中，薄层层析时，使用的显影剂为丙酮、甲醇、环己烷、乙酸乙酯中的一种或多种。进一步优选地，显影剂为甲醇和/或丙酮。在薄层色谱中，使用的薄层板可以是自制的，也可以是市场上的常规产品。为缩短测试时间，减少工作量，提高测试精度，可直接选用市售的活性荧光薄层板。

点样时，样品的滴加应在密闭容器中进行，以免空气中的水分降低活化板的吸附。如果在空气中滴加，一般不超过10min。滴样方法与纸色谱法类似：上样量5-10μg，滴下后起点扩散直径不大于0.5cm，采样点间距不小于1.5cm，样品的起点应至少距离板材底边1.5cm。薄层层析时，薄层板浸入显影剂的深度不应超过0.5cm。展开时，可在展开容器内贴上浸有显影剂的滤纸条，加速蒸汽饱和，实现展开容器的预饱和。薄层板展开距离为10-14cm，展开时间为30-60min。待溶剂到达预先用铅笔标出的前缘后，取出板子，100℃加热20-30分钟或室温干燥，然后用254nm紫外灯照射。气相色谱测定氨，观察现象。可采用一次上升法、二次上升法或逐次上升法进行扩展。薄层层析装置可以使用现有技术，也可以采用专利申请号CN2.2中公开的薄层层析装置。步骤3)中，所述溶剂为丙酮。步骤4)中，气相色谱-质谱分析的分析条件为：色谱柱：HP-5MS（60m*250μm*0.25μm）毛细管柱；入口温度：280°C；载气：He，1ml/min；传输线温度：270℃； EI源电子能量：70eV；倍增电压：1450V；质量扫描范围：30～550amu；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；样品体积：1 μL；分流比：1:10；升温程序：初始温度：50℃，保持2min，然后以5℃/min升温至250℃，保持6min；溶剂延迟时间为6分钟。

在步骤4)中，根据不同色谱峰的保留时间，在光谱峰库中查找污染物即可确定污染物。光谱峰数据库可以从 NIST 库中选择。专利技术薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法确定了萃取、薄层色谱和气相色谱-质谱的分析条件，优化了样品处理方法和色谱条件，可以轻松、快速、有效地测定烟草污染物，提高烟草污染物的筛查效率。附图说明图。图1为本专利技术的确定方法流程图；如图。图2是实施例1的污染烟气样品溶液的色谱图。 具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步说明。实施例1 本实施例采用薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法，流程示意图见图1，包括以下步骤： 50mL锥形瓶和1.0g烟粉样品，将三角瓶置于振荡器中，150rpm振荡30min，静置，过滤，取上清； 2)取上清进行薄层层析，所用薄层板为活化荧光薄层板，包括以下步骤： ①用10 μL移液管定量吸取4 μL上清液进行点样；点样直径不超过0.5cm，点间距离1.5cm，点样起始点距下边缘1.5cm薄层板； ②以丙酮为显影剂，在密闭容器中显影； ，薄层板进入显影剂的深度不超过0.5cm，50min后膨胀达到12.2cm，薄层板100℃加热20min烘干;在板的底部观察到彼此分离的成分点； 3)用铅笔圈出组分点并刮掉，加丙酮洗脱溶解，得到洗脱液；洗脱液采用气相色谱和质谱分析，分析条件为： 色谱柱：HP-5MS（60m*250μm*0.25μm）毛细管柱；入口温度：280℃；载气：He，1ml/min；输电线路温度：270℃； EI源电子能量：70eV；倍增电压：1450V；质量扫描范围：30～550amu；离子源温度：230°C；四极杆温度：150°C；进样量：1 μL；分流比：1:10； ℃，保持2min，然后以5℃/min升温至250℃，保持6min；溶剂延迟时间为6min； 4)比较污染烟雾样品和标准烟雾样品的光谱差异，确定不同色谱峰的保留时间，在NIST库中检索相应的化合物以确定污染物。

本例中污染烟气样品溶液的色谱图如图2所示。根据微分特征峰信息，筛选出的污染物为2-甲氧基乙基十一烷琥珀酸酯基酯，CAS号为1000325-81-1。实施例2 本实施例的薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法包括以下步骤：1)在50mL中加入甲苯30mL和1.0g烟草。锥形瓶 对于最终样品，将锥形瓶置于振荡器中，以 150 rpm 的速度振荡 30 分钟，静置，过滤，获得上清液； 2)取上清进行薄层层析，使用活化薄层板荧光薄层板，包括以下步骤： ①用10 μL移液管定量吸取4 μL上清液进行点样；光斑直径不超过0.5cm，光斑间距1.5cm。点样起点距离薄层板底边1.5cm； ②在密闭容器中使用丙酮作为显影剂

【技术保护点】

一种薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法，其特征在于包括以下步骤：1)在烟草粉末样品中加入萃取剂进行萃取，过滤得到上清液； 2)取上清液进行薄层层析，得到薄层板上相互分离的组分点； 3)去除组分斑点，加入溶剂进行洗脱溶解，得到溶解液； 4)溶解液通过气相色谱-质谱分析得到样品光谱；色谱峰的光谱峰信息可识别污染物。

[技术特征摘要]

1.一种薄层色谱-气相色谱-质谱联用分析烟草污染物的方法，其特征在于包括以下步骤： 1)在烟草粉末样品中加入萃取剂提取、过滤，得到上清液； 2)取上清进行薄层层析，得到薄层板上相互分离的组分3)去除组分斑点，加溶剂洗脱溶解，得到洗脱液； 4)洗脱液经气相色谱-质谱分析，得到样品光谱；比较标准烟雾样品的光谱以确定不同的色谱峰；根据不同色谱峰的光谱峰信息确定污染物。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述萃取剂为环己烷、甲苯、丙酮、水中的任意一种或多种。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，薄层层析时，使用的显影剂为丙酮、甲醇、环己烷、乙酸乙酯中的一种或多种。 4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述薄层片为活化荧光薄层片。 5.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，薄层层析时，点样直径不超过0.5cm，点间距不小于1.5cm，从采样开始...

[专利技术属性]

技术研发人员：张鸿飞、姜兴义、罗彦波、李翔宇、朱峰鹏、李雪、庞永强、

申请人（专利权）：国家烟草质量监督检验中心，

类型：发明

国家省份：河南；41

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